1-2-1- تقسیم‌بندی عفونتهای قارچی از نظر پزشكی: 12

 

1-3- درماتوفیتوزیس (كچلی): 13

 

1-3-1- عوامل بیماری: 14

 

1-3-2- اكولوژی: 15

 

1-3-3-پراكندگی درماتوفیت‌ها 16

 

1-3-4- بیماریزایی: 17

 

1-3-5- تشخیص و شناسایی درماتوفیت‌ها: 18

 

1-3-6- تقسیم‌بندی درماتوفیت‌ها: 19

 

1-3-7- اشكال بالینی عفونتهای ناشی از درماتوفیت‌ها (كچلی‌ها): 22

 

1-3-7-1- كچلی در حیوانات… 26

 

1-4- ترایكوفایتون ویولاسئوم(T.violaceum). 26

 

1-4-1- مشخصات ظاهری كلنی: 27

 

1-4-2 مشخصات ریزبینی: 27

 

1-4-3 تشخیص افتراقی.. 27

 

1-4-4 علایم بالینی: 28

 

1-4-5 راههای انتقال: 29

 

1-4-6- ایمونولوژی ترایكوفایتون‌ ویولاسئوم. 30

 

1-4-7 اپیدمیولوژی: 31

 

1-4-8 درمان: 32

 

1-5 مطالعات بیولوژی مولكولی: 33

 

1-5-1 بیولوژی اسكوالن اپوكسیداز (SE) (منواكسیژناز): 38

 

1-5-2 ویژگی استرول‌ها و نقش اسكوالن اپوكسیداز: 39

 

1-5-4 مكانیسم اثرات داروهای ضد قارچی بر ارگوسترول. 46

 

1-5-5 بررسی مولكولی اسكوالن اپوكسیدازدرقارچها و رابطه آن با مقاومت دارویی: 48

 

–

 

2-2 طراحی پرایمرها: 55

 

2-2-1 آماده سازی پرایمرها: 56

 

2-3 استخراج DNA: 57

 

روش كار: 57

 

2-4 تكثیر ژن سنتزكننده  آنزیم اسكوالن اپوكسیداز توسط PCR: 59

 

2-5 خالص‌سازی محصولات PCR: 60

 

 

 

–

 

3-1 بررسی ماكروسكوپی قارچ درماتوفیت ترایكوفایتون  ویولاسئوم. 64

 

3-2 بررسی میكروسكوپی (ریزبینی) قارچ درماتوفیت ترایكوفایتون ویولاسئوم. 64

 

3-3 : كشت انبوه در محیط SCC  مایع.. 64

 

3-4 استخراج DNA.. 64

 

3- 5 محصول PCR.. 65

 

3-7 تعیین توالی ژن اسكوالن اپوكسیداز در قارچ درماتوفیت ترایكوفایتون ویولاسئوم. 65

 

–

 

 

1-4- بحث… 71

 

4-2- پیشنهادات: 77

 

Refrences: 78

 

 

 

فهرست اشکال

 

.. 66

 

شکل(3-2-1) منظره ریزبینی قارچ ترایكوفایتون ویولاسئوم با درشت نمایی 40×. 66

 

شكل (3-4). 67

 

شكل (3-5). 67

 

شكل (3-6) همولوژی سكانس پروتئین آنزیم اسكوالن اپوكسیداز در قارچ ترایكو فایتون ویولاسئوم  با سایر موجودات   77

 

 

 

چکیده

 

قارچviolaceum    Trichophyton مسئول اپیدمیهای بسیاری از عفونتهای درماتوفیتی می باشد.   

 

ترایکوفایتون ویولاسئوم در انسان ایجاد کچلی بدن، پا، ناخن و دست می کند.همچنین  به  موها حمله و ایجاد کونیدیاهایخارج و داخل مو(اکتواندوتریکس) میکند. کلونیزه شدن درماتوفیتها محدود به بافت های کراتینه و مردۀ لایه شاخی بوده و ممکن است منجر به واکنش های التهابی خفیف تا شدید گردد .ایمنی هومورال،سلولی و نیز دفاع غیراختصاصی میزبان علیه درماتوفیت ها فعال بوده که می توانند باعث حذف قارچ گردند و درنتیجه از پیشرفت عفونت به سمت بافتهای تحتانی جلوگیری نمایند.خصوصیات و ویژگیهای متعددی از این قارچ تاكنون مورد بررسی واقع شده اما در زمینه بیولوژی مولكولی این قارچ مطالعات محدودی انجام گرفته است.موجودات زنده چه پرسلولی و چه تك سلولی بوسیله غشایی احاطه می شوند كه آنها را از محیط اطرافشان مجزا می سازد.تركیب این غشاء بسیار مهم است چرا كه در حفظ و پایداری غشاء دخیل می باشد.استرولها یكی از تركیبات لازم در تمام سلولهای یوكاریوتی می باشد كه البته در سلولهای قارچی نوع ارگوسترول آن موجود است.این تركیب در فعالیتهای مختلفی از جمله در تعدیل سیالیت غشاء، تراوایی و فعالیت آنزیمهای باند شده به غشاء، تنظیم چرخه سلولی و فتواكسیداسیون مؤثر می باشد.از آنزیمهای مؤثر در بیوسنتز این تركیب، می توان به اسكوالن اپوكسیداز اشاره كرد. این آنزیم در مسیر بیوسنتزارگوسترول مهم می باشد و برای فعالیت به مولكول FAD و NADPH  واكسیژن احتیاج دارد .این آنزیم هدف برخی از داروهای ضد قارچی می باشد.عفونتهای درماتوفیتی معمولا به درمان های ضد قارچی موضعی پاسخ میدهند.هرچند در درمان عفونتهای شدید و موارد کچلی پا و ناخن درمانهای موضعی بی ارزش است.همچنین در مواردی که بیماری به فرم مزمن تبدیل میشود درمان های معمول با داروهای ضد قارچی به خوبی پاسخ نمیدهند.بر همین اساس شناخت و وجود این ژن و همچنین مسیرهای متابولیکی آن اقدامی مهم در جهت ساخت دارو یا داروهای مفید ضد این میکروارگانیسم میباشد.