مقدمه

 

 

1-1

 

 

 

4

 

 

فصل دوم: کلیات

 

 

2

 

 

 

5

 

 

سلول بنیادی و تاریخچه

 

 

2-1

 

 

 

6

 

 

تعریف کلی سلول بنیادی

 

 

2-2

 

 

 

6

 

 

تقسیم بندی سلول­های بنیادی

 

 

2-3

 

 

 

6

 

 

تقسیم بندی بر اساس قدرت تمایزی

 

 

2-3-1

 

 

 

7

 

 

تقسیم بندی بر اساس منشاء

 

 

2-3-2

 

 

 

8

 

 

تمایز سلول­های بنیادی

 

 

2-4

 

 

 

8

 

 

منابع سلول­های بنیادی

 

 

2-5

 

 

 

10

 

 

شاخص­های سطحی سلول­های بنیادی

 

 

2-6

 

 

 

10

 

 

سلول­های بنیادی مزانشیمی

 

 

 

2-7

 

 

 

10

 

 

مقدمه

 

 

2-7-1

 

 

 

11

 

 

آنتی ژن­های فنوتیپیک و ویژگی سلول­های بنیادی مزانشیمی

 

 

2-7-2

 

 

 

11

 

 

منبع سلول­های بنیادی مزانشیمی

 

 

2-7-3

 

 

 

12

 

 

جداسازی سلول­های بنیادی مزانشیمی

 

 

2-7-4

 

 

 

12

 

 

مکانیسمهای انعطاف پذیری سلول­های بنیادی مزانشیمی

 

 

2-7-5

 

 

 

13

 

 

خود­نوزائی یا خود­تجدیدی سلول­های بنیادی مزانشیمی

 

 

2-7-6

 

 

 

13

 

 

تمایز سلول­های بنیادی مزانشیمی

 

 

2-7-7

 

 

 

14

 

 

محرک­های آزمایشگاهی تاثیر گذار بر تمایز سلول­های بنیادی مزانشیمی

 

 

2-7-8

 

 

 

14

 

 

مورفولوژی سلول­های بنیادی مزانشیمی

 

 

2-7-9

 

 

 

14

 

 

تاثیر سلول بنیادی مزانشیمی بر روی سیستم ایمنی

 

 

2-7-10

 

 

 

15

 

 

تاثیر سلول­های بنیادی مزانشیمی بروی لنفوسیت­هایT

 

 

2-7-10-1

 

 

 

15

 

 

تاثیر سلول­های بنیادی مزانشیمی برسلول­هایT تنظیمی

 

 

2-7-10-2

 

 

 

15

 

 

تاثیر سلول­های بنیادی مزانشیمی بر لنفوسیت          B

 

 

2-7-10-3

 

 

 

16

 

 

تاثیر سلول­های بنیادی مزانشیمی برسلول­های عرضه كننده آنتی ژن

 

 

2-7-10-4

 

 

 

16

 

 

حفاظت عصبی سلول­های بنیادی مزانشیمی

 

 

2-8

 

 

 

17

 

 

فاکتورهای سرکوب سیستم ایمنی سلول­های مزانشیمی

 

 

2-9

 

 

 

19

 

 

نحوه کاربرد سلول­های بنیادی مزانشیمی

 

 

2-10

 

 

 

19

 

 

استفاده درمانی از سلول­های بنیادی مزانشیمی

 

 

2-11

 

 

 

20

 

 

سیستم ایمنی

 

 

2-12

 

 

 

20

 

 

اجزای سیستم ایمنی

 

 

2-12-1

 

 

 

21

 

 

التهاب

 

 

2-12-2

 

 

 

21

 

 

نوتروفیل

 

 

2-12-3

 

 

 

22

 

 

گرانول­های نوتروفیل

 

 

2-12-4

 

 

 

22

 

 

فاگوسیتوز

 

 

2-12-5

 

 

 

24

 

 

انفجار تنفسی

 

 

2-12-6

 

 

 

25

 

 

آنزیم­های تجزیه کننده

 

 

2-12-7

 

 

 

25

 

 

فعال شدن نوتروفیل

 

 

2-12-8

 

 

 

25

 

 

پذیرنده­های سطحی نوتروفیل

 

 

2-12-9

 

 

 

26

 

 

سرنوشت نوتروفیل­ها

 

 

2-12-10

 

 

 

26

 

 

انواع مرگ سلولی

 

 

2-13

 

 

 

26

 

 

آپوپتوز

 

 

2-13-1

 

 

 

27

 

 

مسیرهای آپوپتوزی

 

 

2-13-2

 

 

 

29

 

 

ویتامین

 

 

2-14

 

 

 

29

 

 

انواع ویتامین

 

 

2-14-1

 

 

 

30

 

 

ویتامین D

 

 

2-14-2

 

 

 

32

 

 

فصل سوم: مواد و روش کار

 

 

3

 

 

 

33

 

 

طرز تهیه محیط کشت DMEM

 

 

3-1

 

 

 

34

 

 

طرز تهیه محیط کشت RPMI

 

 

3-2

 

 

 

35

 

 

تعیین زنده­مانی و شمارش سلول به روش تریپان بلو

 

 

3-3

 

 

 

36

 

 

جدا سازی وکشت سلول بنیادی مزانشیمال مغز استخوان رت

 

 

3-4

 

 

 

38

 

 

تریپسینه کردن وپاساژ دادن سلول­ها

 

 

3-5

 

 

 

39

 

 

جداسازی نوتروفیل

 

 

3-6

 

 

 

41

 

 

تیمار سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان رت با ویتامین D3

 

 

3-7

 

 

 

41

 

 

مجاور­سازی سلول­های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان رت تیمار شده با ویتامین D3 و مایع رویی آنها با نوتروفیل های جدا شده از خون محیطی رت

 

 

3-8

 

 

 

41

 

 

مجاورسازی سلول­های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان رت تیمار شده با ویتامین D3 با سلول­های نوتروفیل

 

 

3-8-1

 

 

 

41

 

 

مجاور سازی مایع­رویی سلول­های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان تیمار شده با ویتامین D3 با سلول­های نوتروفیل

 

 

3-8-2

 

 

 

42

 

 

فاگوسیتوز مخمر

 

 

3-9

 

 

 

42

 

 

آماده سازی سوسپانسیون مخمر

 

 

3-9-1

 

 

 

43

 

 

روش انجام فاگوسیتوز

 

 

3-9-2

 

 

 

45

 

 

سنجش انفجار تنفسی توسط احیاء نیتروبلوتترازولیوم (NBT)

 

 

3-10

 

 

 

46

 

 

سنجش زنده­مانی سلول نوتروفیل در مواجه با سلول­های بنیادی مزانشیمی و مایع رویی آن

 

 

3-11

 

 

 

47

 

 

آنالیز آماری

 

 

3-12

 

 

 

48

 

 

فصل چهارم: نتایج

 

 

4

 

 

 

49

 

 

نتایج مجاورسازی سلول مزانشیمی تیمار شده و سلول نوتروفیل                       

 

 

4-1

 

 

 

49

 

 

ارزیابی قابلیت انفجار تنفسی(NBT)                                            

 

 

4-1-1

 

 

 

49

 

 

ارزیابی فاگوسیتوز                                                                  

 

 

4-1-2

 

 

 

50

 

 

ارزیابی آپوپتوز

 

 

4-1-3

 

 

 

51

 

 

نتایج مجاورسازی مایع رویی سلول مزانشیمی تیمار شده  و  سلول نوتروفیل

 

 

4-2

 

 

 

51

 

 

ارزیابی قابلیت انفجار تنفسی(NBT)

 

 

4-2-1

 

 

 

52

 

 

ارزیابی فاگوسیتوز

 

 

4-2-2

 

 

 

53

 

 

ارزیابی آپوپتوز

 

 

4-2-3

 

 

 

56

 

 

فصل پنجم: بحث و پیشنهادات

 

 

5

 

 

 

57

 

 

بحث

 

 

5-1

 

 

 

60

 

 

پیشنهادات

 

 

5-2

 

 

 

61

 

 

فصل ششم: منابع

 

 

6

 

 

 

62

 

 

منابع

 

 

6-1

 

 

 

73

 

 

چکیده انگلیسی

 

 

 

 

 

فهرست نمودارها

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

صفحه	عنوان	ردیف
49	ارزیابی قابلیت انفجار تنفسی سلول­های نوتروفیل مجاور شده با سلول­های مزانشیمی تیمار شده با غلظت­های متفاوت ویتامین D3 در زمان­های مختلف	4-1
50	ارزیابی قابلیت فاگوسیتوز سلول­های نوتروفیل مجاور شده با سلول­های مزانشیمال تیمار شده با غلظت­های متفاوت ویتامین D3 در زمان­های مختلف	4-2
51	ارزیابی میزان آپوپتوز سلول­های نوتروفیل مجاور شده با سلول­های مزانشیمال تیمار شده با غلظت­های متفاوت ویتامین D3 در زمان­های مختلف	4-3
52	ارزیابی میزان انفجار تنفسی سلول­های نوتروفیل مجاور شده با مایع­رویی سلول­های مزانشیمی تیمار شده با غلظت­های متفاوت ویتامین D3 در زمان­های مختلف	4-4
52	ارزیابی میزان فاگوسیتوز سلول­های نوتروفیل مجاور شده با مایع­رویی سلول­های مزانشیمی تیمار شده با غلظت­های متفاوت ویتامین D3 در زمان­های مختلف	4-5
53	ارزیابی میزان آپوپتوز سلول­های نوتروفیل مجاور شده با مایع­رویی سلول­های مزانشیمی تیمار شده با غلظت­های متفاوت ویتامین D3 در زمان­های مختلف	4-6

 

فهرست تصاویر