1-6-2 -کاربرد LTP در حسگر های زیستی …………………………………………………………………………………………….17

 

1-7- هدف تحقیق…………………………………………………………………………………………………………………………………17

 

1-8- ضرورت انجام تحقیق……………………………………………………………………………………………………………………..17

 

فصل دوم: موادوروش ها

 

2-1- تجهیزات و دستگاه های مورد استفاده…………………………………………………………………………………………………18

 

2-2- مواد مصرفی و نحوه ساخت………………………………………………………………………………………………………………19

 

2-3- بخش آزمایشگاهی…………………………………………………………………………………………………………………………21

 

2-4- سویه های باکتری استفاده شده…………………………………………………………………………………………………………21

 

2-5- ناقل های استفاده شده………………………………………………………………………………………………………………………21

 

2-6-طراحی وسنتز ژن nsLTP2 برنج ایرانی……………………………………………………………………………………………..22

 

2-7- شرایط استریل کردن……………………………………………………………………………………………………………………….25

 

2-8-محیط کشت لوریا برتانی (LB)…………………………………………………………………………………………………………25

 

2-9- آنتی بیوتیک…………………………………………………………………………………………………………………………………26

 

2-10- شرایط کشت و نگهداری سویه های باکتری اشرشیا کلی………………………………………………………………………26

 

2-10-1- طرز تهیه استوک گلیسرول…………………………………………………………………………………………………………26

 

2-11- استخراج ناقل………………………………………………………………………………………………………………………………26

 

2-11-1- استخراج ناقل با روش لیز قلیایی……………………………………………………………………………………………………26

 

2-11-1-1- روش انجام استخراج ناقل با روش لیز قلیایی…………………………………………………………………………………28

 

2-11-2- استخراج ناقل با استفاده از کیت شرکت بیو بیسیک………………………………………………………………………….30

 

2-11-2-1- روش انجام استخراج ناقل با استفاده از کیت شرکت بیوبیسیک……………………………………………………….31

 

2-12- الکتروفورز DNA بر روی ژل آگارز………………………………………………………………………………………………32

 

2-12-1- مواد لازم جهت الکتروفورز DNA بر روی ژل آگارز……………………………………………………………………..32

 

2-12-1-1- بافر TAE…………………………………………………………………………………………………………………………..32

 

2-12-1-2- بافر TBE…………………………………………………………………………………………………………………………..33

 

2-12-1-3-تهیه ژل آگارز………………………………………………………………………………………………………………………33

 

2-12-1-4- نشانگر اندازه DNA…………………………………………………………………………………………………………….34

 

2-12-1-5-رنگ سایبر گرین………………………………………………………………………………………………………………….35

 

2-12-1-6- بافر بارگذاری………………………………………………………………………………………………………………………36

 

2-12-2- تعیین اندازه و غلظت DNA توسط الکتروفورز………………………………………………………………………………36

 

2-12-3- تخمین غلظت DNA با استفاده از دستگاه اسپکتروفتومتر………………………………………………………………….36

 

2-13- تهیه سلول های مستعد از باکتری اشرشیاکلی با روش شیمیایی………………………………………………………………..37

 

2-13-1- مواد لازم………………………………………………………………………………………………………………………………..37

 

2-13-2- تهیه سلول مستعد………………………………………………………………………………………………………………………38

 

2-14- ترانسفورماسیون با روش شوک گرمایی…………………………………………………………………………………………….38

 

2-14-1- روش انجام ترانسفورماسیون………………………………………………………………………………………………………..39

 

2-15- هضم آنزیمی با آنزیم های محدود کننده…………………………………………………………………………………………..40

 

2-15-1- مواد لازم برای هضم آنزیمی با آنزیم های محدود کننده……………………………………………………………………40

 

2-15-1-1- آنزیم (Thermo scientific) XhoI…………………………………………………………………………………..42

 

2-15-1-2- آنزیم (Thermo Scientific) NcoI…………………………………………………………………………………..42

 

2-15-1-3 آنزیم BpiI (Thermo Scientific)……………………………………………………………………………………..42

 

2-16- خالص سازی DNA از ژل…………………………………………………………………………………………………………….42

 

2-16-1- مواد لازم برای  خالص سازی DNA از ژل……………………………………………………………………………………43

 

2-16-2- روش انجام استخراج DNA از ژل………………………………………………………………………………………………43

 

2-17- تکنیک الحاق………………………………………………………………………………………………………………………………44

 

2-17-1-مواد لازم برای تکنیک الحاق……………………………………………………………………………………………………….44

 

2-17-2- روش انجام تکنیک الحاق…………………………………………………………………………………………………………..45

 

2-18- واکنش کلنی PCR……………………………………………………………………………………………………………………..45

 

2-18-1- روش انجام واکنش کلنی- PCR………………………………………………………………………………………………..45

 

2-19- تعیین توالی ژن rice-nsLTP2……………………………………………………………………………………………………..47

 

2-20-مطالعات بیوانفورماتیکی…………………………………………………………………………………………………………………47

 

2-20-1-نرم افزار ها و سرورهای مورد استفاده…………………………………………………………………………………………….47

 

2-20-2-برر سی توالی nsLTP2…………………………………………………………………………………………………………….48

 

2-20-3-بررسی هیدروفوبیسیته یnsLTP2  برنج ایرانی………………………………………………………………………………49

 

 

2-20-4-بررسی خاصیت آنتی ژنیسیتی nsLTP2 برنج ایرانی ……………………………………………………………………….50

 

2-20-5-Molecular Docking………………………………………………………………………………………………………….51

 

فصل سوم:نتایج

 

3-1-استخراج ناقل های pET26b  و pUC57  با روش لیز قلیایی ………………………………………………………………52

 

3-2-نتایج هضم آنزیمی ناقل pET26b  وقطعه ی nsLTP2  جهش یافته……………………………………………………….53

 

3-3-نتایج خالص سازی از ژل………………………………………………………………………………………………………………….54

 

3-4-واکنش الحاق………………………………………………………………………………………………………………………………..55

 

3-5-ترانسفورماسیون ناقل pET26b  نوترکیب ایجاد شده…………………………………………………………………………..56

 

3-6-غربالگری ناقل های  pET26b حاوی ژن nsLTP2 جهش یافته…………………………………………………………..57

 

3-6-1-واکنش کلنی-PCR…………………………………………………………………………………………………………………..57

 

3-6-2-نتایج استخراج ناقل های  pET26b نوترکیب…………………………………………………………………………………58

 

3-6-3- نتایج هضم آنزیمی ناقل نوترکیب…………………………………………………………………………………………………59

 

3-6-4-نتایج تعیین توالی قطعه ی وارد شده به ناقل pET26b………………………………………………………………………60

 

3-7-نتایج بخش بیوانفورماتیک………………………………………………………………………………………………………………..61

 

3-7-1- بررسی ساختار اول پروتئین nsLTP2 برنج …………………………………………………………………………………..61

 

3-8- جهش زایی پروتئین nsLTP2 برنج ایرانی و Molecular Docking…………………………………………………67

 

فصل چهارم:بحث و نتیجه گیری

 

4-1 –کلیات…………………………………………………………………………………………………………………………………………68

 

4-2- مقایسهnsLTP2   و nsLTP1 ……………………………………………………………………………………………………….69

 

4-3- سنتز ژن جهش یافته  nsLTP2 گیاه برنج ایرانی ………………………………………………………………………………….70

 

4-4 -همسانه سازی ژن جهش یافته ی nsltp2 برنج ایرانی……………………………………………………………………………..71

 

4-5- بررسی نوع وحشی و جهش یافته nsLTP2 گیاه برنج ایرانی…………………………………………………………………..71

 

4-6- بررسی خاصیت آنتی ژنیسیتی nsLTP2 گیاه برنج ایرانی………………………………………………………………………72

 

4-7- نتیجه گیری کلی…………………………………………………………………………………………………………………………….74

 

4-8- پیشنهادات جهت تحقیقات آینده……………………………………………………………………………………………………….75

 

فهرست شکل ها

 

عنوان                                                                                                                          صفحه

 

شکل1-1-تصویر شماتیک ناحیه ی کد کننده ی ژنLTP2  گیاه برنج ایرانی………………………………………………………5

 

شکل1-2-بررسی توالی  nsLTP1 و nsLTP2 در برخی از گیاهان……………………………………………………………….5

 

شکل1-3-الگوی تشکیل چهار نوع پیوند دی سولفیدی در دو نوع LTP موجود در گیاه برنج………………………………6

 

شکل1-4-توالی و ساختار LTP1………………………………………………………………………………………………………………8

 

شکل 1-5-توالی و ساختار LTP2…………………………………………………………………………………………………………….9

 

شکل1-6-نمای کلی از وجود ساختار های ثانویه ی آلفا هلیکس در ساختار LTP1 و LTP2……………………………..9

 

شکل 1-7-تطابق اسید آمینه ای آلرژن های LTP……………………………………………………………………………………….12

 

شکل1-8-برهمکنش ترکیبات مختلف از جمله کلسترول وانواع LTP ،………………………………………………………….16

 

شکل2-1-دیاگرام شماتیک نقشه ی ژنتیکی pET26b………………………………………………………………………………..22

 

شکل 2-2-دیاگرام شماتیک نقشه ی ژنتیکی pUC57…………………………………………………………………………………23

 

شکل2-3-توالی ژنی طراحی شده ی  nsLTP2 برنج ایرانی…………………………………………………………………………..24

 

شکل2-4-اندازه نمایDNA…………………………………………………………………………………………………………………..35

 

شکل2-5-نمایی شماتیک از واکنش ترانسفورماسیون…………………………………………………………………………………..40

 

شکل3-1-نتایج استخراج ناقل با کیت استخراج پلازمید شرکت بیوبیسیک……………………………………………………….53

 

شکل3-2-نتایج هضم آنزیمی…………………………………………………………………………………………………………………..54

 

شکل3-3-بررسی کیفیت قطعات استخراج شده از ژل…………………………………………………………………………………..55

 

شکل 3-4-نتایج تهیه ی سلول های مستعد………………………………………………………………………………………………….56

 

شکل3-5-نتایج ترانسفورماسیون ناقل pET26b…………………………………………………………………………………………57

 

شکل 3-6-نتیجه ی  کلونی- PCR  ………………………………………………………………………………………………………..58

 

شکل 3-7-استخراج ناقل pET26b نوترکیب……………………………………………………………………………………………59

 

شکل3-8-بررسی هضم آنزیمی ناقل نوترکیب…………………………………………………………………………………………….60

 

شکل3-9-نتیجه  ی توالی یابی جهش های F39A  و L28A ……………………………………………………………………..61

 

شکل3-10-بخش های غشاء گذر و هیدروفوب پروتئین nsLTP2  با روش TMHMM………………………………….63

 

شکل3-11-نواحی هیدروفوب توالی پروتئینی nsLTP2 با روش Sliding Widow……………………………………….64

 

شکل 3-12-. میانگین میزان  آنتی ژنیسیته ی آمینو اسید های توالی پروتئینی nsLTP2 در حالت طبیعی………….65

 

شکل3-13- میانگین میزان  آنتی ژنیسیته ی آمینو اسید های توالی پروتئینی nsLTP2 در توالی جهش یافته………………….65

 

شکل3-14- ساختار شیمیایی LysoPC14  ……………………………………………………………………………………………..67

 

فهرست جدول ها

 

عنوان                                                                                                                          صفحه

 

جدول1-1- ساختار های LTP1  بررسی شده به وسیله ی NMR و کریستالوگرافی اشعه ی X……………………………7

 

جدول 2-1-تجهیزات و دستگاه های مورد استفاده……………………………………………………………………………………….19

 

جدول2-2-  فهرست مواد مورد استفاده……………………………………………………………………………………………………..20

 

جدول 2-3- ترکیبات محیط کشت LB…………………………………………………………………………………………………….25

 

جدول2-4- مواد لازم برای ساخت محلول I استخراج ناقل……………………………………………………………………………27

 

جدول 2-5-مواد لازم برای ساخت محلول II استخراج ناقل…………………………………………………………………………..27

 

جدول 2-6-مواد لازم برای ساخت   محلول III استخراج ناقل……………………………………………………………………….28

 

جدول 2-7-مواد لازم برای ساخت محلول TE…………………………………………………………………………………………..28

 

جدول 2-8-محتویات کیت استخراج ناقل بیوبیسیک……………………………………………………………………………………30

 

جدول 2-9 مواد لازم برای ساخت  بافر TAE10X…………………………………………………………………………………….32

 

جدول2-10- مواد لازم برای ساخت بافر TBE10X…………………………………………………………………………………..33

 

جدول 2-11-ترکیب بافر بارگذاری 6X……………………………………………………………………………………………………36

 

جدول 2-12- مواد لازم جهت تهیه سلول مستعد………………………………………………………………………………………….37

 

جدول 2-13-غلظت آنتی بیوتیک برای انتخاب سویه ی مقاوم……………………………………………………………………….39

 

جدول 2-14-ترکیبات لازم برای واکنش هضم آنزیمی دوگانه ب برای ناقل pET26b…………………………………….41

 

جدول2-15-ترکیبات لازم برای واکنش هضم آنزیمی دوگانه برای ناقل pUC57 …………………………………………..41

 

جدول 2-16-محتویات کیت استخراج DNA از ژل بیونیر……………………………………………………………………………43

 

جدول 2-17-ترکیبات لازم برای واکنش اتصال با استفاده از ناقل pET26b……………………………………………………45

 

جدول2-18-مواد مورد نیاز برای PCR…………………………………………………………………………………………………….46

 

جدول 2-19-برنامه ی زمانی و دمایی واکنش کلنی PCR……………………………………………………………………………47

 

جدول2-20-نرم افزار ها و سرورهای مورد استفاده……………………………………………………………………………………….48

 

جدول 2-21-میزان هیدروفوبیسیته ی هر آمینو اسید……………………………………………………………………………………..49

 

جدول2-22-پارامتر های تنظیم شده در زمان Docking……………………………………………………………………………..51

 

جدول3-1- ویژگی های فیزیکو شیمیایی nsLTP2  برنج ایرانی…………………………………………………………………..62

 

جدول 3-2-موتیف ها و محل قرار گیری آن ها روی توالی nsLTP2 برنج ایرانی……………………………………………63

 

جدول 3-3-نواحی آنتی ژن توالی پروتئینی nsLTP2  برنج ایرانی………………………………………………………………..64

 

جدول 3-4-نواحی آنتی ژنیک  موجود در توالی nsLTP2 برنج ایرانی که با MHC-II واکنش می دهد……………66

 

2-2-4- تغذیه و خسارت………………………………………………………………………………………. 9

 

2-2-5- مبارزه بیولوژیک………………………………………………………………………………………. 10

 

2-2-5-1- عوامل موثر بر سازگاری و کارایی دشمنان طبیعی…………………………………………. 15

 

2-2-5-2- ثابت دمایی…………………………………………………………………………………………. 15

 

2-2-5-3- اثر دما بر واكنش‌های بیوشیمیایی……………………………………………………………… 16

 

2-3- زنبورهای پارازیتوئید بالا خانواده Bethyloidea………………………………………………… 17

 

2-4- خانواده Bethylidae …………………………………………………………………………………. 17

 

2-4-1- مرفولوژی خانواده Bethylidae ……………………………………………………………….. 17

 

فصل سوم : مواد وروشها

 

3-1- جمع آوری و شناسایی Goniozus spp.………………………………………………………… 20

 

3-2- پرورش آزمایشگاهی پارازیتوئید Goniozus spp. و کرم میوه خوار خرما……………….. 21

 

3-2-1- پرورش کرم میوه خوار خرما……………………………………………………………………….. 21

 

3-2-2- پرورش زنبور پارازیتوئید……………………………………………………………………………. 22

 

3-3- بررسی زیست شناسی زنبورهای پارازیتوئید………………………………………………………… 24

 

3-3-1- طول عمر زنبورهای نر و ماده و طول دوره باروری ………………………………………….. 24

 

3-4- بررسی الگوی تخمگذاری زنبورهای پارازیتوئید……………………………………………………. 26

 

3-5- بررسی رابطه وزن میزبان و تعداد تخم گذاشته شده………………………………………………. 26

 

3-6-تجزیه وتحلیل داده ها…………………………………………………………………………………….. 26

 

فصل چهارم : نتایج

 

4-1- جمع آوری و شناسایی زنبورهای پارازیتوئید کرم میوه خوار خرما…………………………….. 27

 

4-2- شكل شناسی زنبور پارازیتوئید Goniozus spp. (تخم، لارو، شفیره و حشره بالغ)……. 28

 

4-3- زیست شناسی زنبور پارازیتوئید Goniozus spp. ……………………………………………. 32

 

4-3-1- طول دوره زندگی (تخم، لارو، شفیره و حشره بالغ)………………………………………….. 34

 

4-3-2- رفتار تخم گذاری…………………………………………………………………………………….. 36

 

4-3-3- طول عمر زنبورهای نر و ماده………………………………………………………………………. 38

 

4-3-4- بررسی نسبت جنسی زنبورهای نر و ماده بر روی مراحل مختلف رشدی کرم میوه خوار خرما       38

 

4-4- تعیین الگوی تخمگذاری زنبورهای پارازیتوئید……………………………………………………..   39

 

4-5- بررسی رابطه وزن میزبان و تعداد تخم گذاشته شده………………………………………………. 42

 

فصل پنجم: بحث

 

پیوست ها……………………………………………………………………………………………………………. 59

 

فهرست منابع……………………………………………………………………………………………………….. 62

 

Abstract ………………………………………………………………………………………………………… 65

 

فهرست جداول

 

جدول شماره4-1- زیست شناسی زنبور پارازیتوئید Goniozus spp. بر روی کرم میوه خوار خرما

 

در شرایط آزمایشگاهی، دما 1±28 درجه سانتی گراد، رطوبت نسبی 5±60 درصد، 14ساعت روشنایی

 

و10 ساعت تاریکی……………………………………………………………………………………………… 36

 

جدول شماره 4-2- الگوی تخمگذاری در شرایط آزمایشگاهی 2±26 درجه سانتی گراد، رطوبت

 

نسبی60-70 درصد و 14 ساعت روشنایی و 10 ساعت تاریکی…………………………………….. 39

 

جدول شماره 4-3-تجزیه واریانس پراکنش تعداد تخم زنبور پارازیتوئید Goniozus spp. روی

 

سطوح لاروی کرم میوه خوار خرما بدون در نظر گرفتن قفسه سینه و شکم ………………………………………………………………………………………………………………………… 40

 

جدول شماره 4-4- تجزیه واریانس بین گروه ها و داخل گروه ها  41

 

جدول شماره4-5- جدول فراوانی تعداد تخم زنبور پارازیتوئید Goniozus spp. روی سطوح لاروی

 

کرم میوه خوار خرما …………………………………………………………………………. 41

 

جدول شماره4-6- جدول توصیفی بیشترین و کمترین تعداد تخم زنبور پارازیتوئید spp.  Goniozus

 

روی سطوح لاروی کرم میوه خوار خرما. ………………………………………. 42

 

جدول شماره 4-7- جدول تجزیه واریانس تعداد تخم زنبور پارازیتوئید Goniozus spp. روی

 

بندهای لارو کرم میوه خوار خرما…………………………………………………. 42

 

جدول شماره 4-8- جدول توصیفی بیشترین و کمترین تعداد تخم زنبور پارازیتوئید      Gomiozus spp. روی قفسه سینه و شکم لارو کرم میوه خوار خرما ……………………………………………………………………………………………………………… 43

 

جدول شماره 4-9- جدول توصیفی بیشترین و کمترین تعداد تخم زنبور پارازیتوئید Gomiozus spp.

 

در نواحی مختلف بدن لارو کرم میوه خوار خرما………………….. 43

 

جدول شماره4-10- جدول تجزیه واریانس تعداد تخم زنبور پارازیتوئید Goniozus spp. روی

 

بندهای شکم و قفسه سینه لارو کرم میوه خوار خرما………… 44

 

جدول شماره 4-11- جدول گروه بندی میانگین تعداد تخم زنبور پارازیتوئید Goniozus spp.

 

 

روی نواحی مختلف بدن لارو کرم میوه خوار خرما (بر اساس قانون دانکن) ………………………………………………………………………………………………………………………… 45

 

جدول شماره 4-12- تعداد تخم گذاشته شده توسط زنبور پارازیتوئید Goniozus spp. روی لارو

 

کرم میوه خوار خرما………………………….. 47

 

فهرست نمودار

 

نمودار شماره 4-1- نمودار تجمعی نتایج پیش بینی شده و نتایج مشاهدات…………………………. 47

 

فهرست اشكال

 

عکس2-1- مورفولوژی زنبورهای خانواده Bethyloidea ……………………………………………. 19

 

عکس3- 1- انكوباتور حاوی ظروف پرورش زنبورهای پارازیتوئید…………………………………… 22

 

عکس3-2- اتاق پرورش بخش تحقیقات حشره شناسی كشاورزی…………………………………… 23

 

عکس3-3- ظروف بررسی رفتار زنبورهای پارازیتوئید در اتاق پرورش……………………………… 23

 

عکس 3-4- پتری دیشهای بررسی نسبت جنسی زنبورهای پارازیتوئید………………………………. 25

 

عکس3-5- ظروف بررسی الگوی تخمگذاری……………………………………………………………… 26

 

عکس4 -1- رگبندی بال جلویی در Goniozus spp…………………………………………………. 27

 

عکس4 -2- تخم بیضی شکل، موازی محور طولی بدن………………………………………………….. 28

 

عکس 4-3- تخمگذاری به صورت دسته جمعی………………………………………………………….. 29

 

عکس 4-4- مراحل اولیه لاروی………………………………………………………………………………. 29

 

عکس 4-5- مرحله انتهای لاروی…………………………………………………………………………….. 30

 

عکس 4-6-  سوراخ دایره ای شکل، محل خروج حشره کامل از پیله ابریشمی سفید…………….. 31

 

عکس 4-7- حشره بالغ زنبور پارازیتوئید Goniozus spp………………………………………….. 32

 

عکس 4-8- سطح شکمی شفیره بدون پیله…………………………………………………………………. 33

 

عکس 4-9- سطح پشتی شفیره بدون پیله…………………………………………………………………… 34

 

عکس4-10- حشره بالغ زنبور پارازیتوئید (نر)…………………………………………………………….. 35

 

2-1-5 )بانک روس و ایران. 14

 

2-1-6) بانک‌های ایرانی. 14

 

2-1-7 )بانک ملی ایران. 14

 

2-1-8) ایجاد بانک‌های خصوصی در ایران. 15

 

2-1-9 )بانک مرکزی ایران. 15

 

2-1-10) نظام بانکی بعد از انقلاب اسلامی ایران. 15

 

2-1-11 )سیر تحول فناوری اطلاعات در صنعت بانکداری. 16

 

2-1-11-1) دوره اول: اتوماسیون پشت باجه : 16

 

2-1-11-2) دوره دوم: 16

 

2-1-11-3 )دوره سوم : 16

 

2-1-11-4 دوره چهارم: 17

 

2-1-12) نقش فناوری اطلاعات در بانکداری الکترونیک: 18

 

2-1-13) مزایای بانکداری الکترونیک… 18

 

2-1-14 )یک فرصت ، یک تهدید 19

 

2-1-15 )در ایران. 19

 

2-1-16) تعریف بانکداری الکترونیک: 20

 

2-1-17)برخی از عوامل تاثیر گذار در توسعه بانکداری الکترونیک: 20

 

2-1-18 )ضرورت بکارگیری فناوری اطلاعات در ارائه خدمات بانکی: 21

 

2-1-19) عملیات بانکداری الکترونیک درسیستم بانکی کشور. 24

 

2-1-20) درگاه ها و محصولات بانکداری الکترونیک : 25

 

2-1-20-1) ترمینالها و تجهیزات بانکداری الکترونیک… 26

 

2-1-20-2 ) کارت بانکی : 27

 

2-1-20-3 )سامانه های بانکداری مجازی: 29

 

2-1-21 )مزایای همراه بانک… 32

 

2-1-22 )دیگر فواید بانکداری همراه 33

 

2-1-23 )مزایای بانکداری همراه از دیدگاه بانک ها 34

 

2-1-23-1)تشدید رقابت در بانک ها 34

 

2-1-23-2 )گروه هدف.. 34

 

2-1-24 )تاریخچه بانکداری همراه 35

 

بخش دوم : 36

 

بازاریابی خدمات  و پذیرش مشتری. 36

 

2-2 بخش دوم : بازاریابی خدمات  و پذیرش مشتری. 37

 

2-2-1 )بازاریابی. 37

 

2-2-2) انواع بازاریابی. 37

 

2-2-3 )مدیریت بازاریابی خدمات.. 37

 

.. 37

 

2-2-5) مشتری. 38

 

2-2-6 )عواملی که برای مشتری اهمیت دارد. 38

 

2-2-7) خط مشی پذیرش مشتری. 39

 

2-2-8) شناسایی هویت مشتری. 39

 

2-2-9) الزامات کلی برای شناسایی هویت مشتریان. 41

 

2-2-10) مدل های پذیرش و به کارگیری فناوری اطلاعات.. 41

 

بخش سوم : 45

 

2-3 )بخش سوم : بانک صادرات.. 46

 

2-3-1 )تاریخچه 46

 

2-3-2) سرمایه اولیه بانك. 46

 

2-3-3 )شروع كار اولین شعبه 46

 

2-3-4 )عملکرد بانک در اولین سالها 47

 

2-3-5 )خصوصی شدن دوباره بانک… 47

 

2-3-6) بانکداری همراه در بانک صادرات.. 48

 

2-3-7 )معرفی خدمات بانک… 48

 

2-3-8 )خدمات ارائه شده از طریق همراه بانک صادرات.. 48

 

. 48

 

 

2-4-1 تحقیقات داخلی. 48

 

2-4-2 )تحقیقات خارجی. 52

 

 

 

3-1) مقدمه 57

 

3-2 )روش پژوهش.. 57

 

3-3 )جامعه آماری. 57

 

3-4 )نمونه آماری و روش نمونه گیری. 57

 

3-5 )ابزار گردآوری داده ها 58

 

3-6 )روایی و پایایی ابزار اندازه گیری. 58

 

3-7 )تفکیک سوالات پرسشنامه بر مبنای فرضیات.. 60

 

3-8 )روش تجزیه و تحلیل داده ها 60

 

 

 

4-1 )مقدمه 62

 

4-2 )یافته های تحقیق. 62

 

4-2-1 ) تحلیل های آماری توصیفی. 62

 

4-2-1-1) جنسیت.. 63

 

4-2-1-2 ) میزان تحصیلات.. 63

 

4-2-1-3  سن. 64

 

4-2-2 )توزیع توصیفی متغیرها 66

 

4-3 )آمار استنباطی و آزمون فرضیه ها 67

 

4-4 بررسی نرمال بودن داده ها با استفاده از آزمون کولمو گروف – اسمیرنوف.. 67

 

4-5 )آزمون فرضیات: 68

 

4-5-1) آزمون همبستگی : 68

 

4-5-2) رگرسیون. 72

 

4-5-3 )آزمون رتبه بندی فریدمن. 76

 

 

 

5-1) مقدمه 79

 

5-2 )بیان اهداف تحقیق. 79

 

5-3 )یافته های حاصل از توصیف داده ها 79

 

5-4 )یافته های حاصل از سوالات پژوهش.. 79

 

5-5) ارائه مدل مفهومی. 82

 

5-5) بحث و نتیجه گیری. 84

 

5-5-1) پیشنهادات مبتنی بر نتایج. 84

 

5-5-2 )محدودیت های تحقیق. 85

 

5-5-3) محدودیت های خارج از کنترل. 86

 

5-5-4 )پیشنهاد برای پژوهش های آتی. 86

 

منابع و مأخذ 100

 

پیوستها و ضمائم 87

 

 

 

 

 

 

 

 

 

فهرست جداول

 

جدول 2-1   میانگین هزینه برای بانک ها به ازای هر مشتری. 24

 

جدول 3-1 آلفای کرونباخ سوالات پرسشنامه 59

 

جدول 4-1   توزیع فراوانی جنسیت پاسخ دهندگان. 63

 

جدول 4-2   توزیع فراوانی سطح تحصیلات پاسخ دهندگان. 64

 

جدول 4-3  توزیع فراوانی بر اساس سن پاسخ دهندگان. 64

 

جدول 4-4 توزیع فراوانی تبلیغات همراه بانک… 66

 

جدول 4-5  شاخص های توصیفی متغیرهای تحقیق. 66

 

جدول 4-7 نتیجه آزمون همبستگی رابطه اعتماد و پذیرش همراه بانک… 69

 

جدول 4-8 نتیجه  آزمون همبستگی رابطه شرایط تسهیل کننده و پذیرش همراه 69

 

جدول 4-9 نتیجه آزمون همبستگی رابطه کارایی مورد انتظار مشتری و پذیرش همراه بانک………..90

 

جدول 4-10 نتیجه آزمون همبستگی رابطه تبلیغات و اعتماد مشتری. 71

 

جدول 4-11 نتیجه آزمون همبستگی رابطه تبلیغات و کارایی مورد انتظار مشتری. 71

 

جدول 4-12  نتایج رگرسیون فرضیه اول. 73

 

جدول 4-13  نتایج رگرسیون فرضیه دوم 73

 

جدول 4-14   نتایج رگرسیون فرضیه سوم 74

 

جدول 4-15  نتایج رگرسیون فرضیه چهارم 75

 

جدول 4-16  نتایج رگرسیون فرضیه پنجم 75

 

جدول 4-17  آزمون فریدمن. 76

 

جدول 4-20 آزمون آماری فریدمن تبلیغات.. 77

 

جدول 4-18 آزمون آماری- نتیجه آزمون فریدمن. 76

 

جدول 4-19 آزمون فریدمن تبلیغات.. 77

 

2-4 پری بیوتیک ها ……………………………………………………………………………………………………………………………………………30

 

2-4-1 ویژگی یک پروبیوتیک  …………………………………………………………………………………………………………………………….32

 

2-4-2 مواد شناخته شده ه عنوان پروبیوتیک  ………………………………………………………………………………………………………..32

 

2-5 دستگاه گوارش پرندگان  ………………………………………………………………………………………………………………………………40

 

2-5-1 ساختمان عمومی لوله گوارش  ………………………………………………………………………………………………………………….40

 

2-5-2 وضع تشریحی روده باریک  ……………………………………………………………………………………………………………………..42

 

2-6 فراسنجه های خونی  ……………………………………………………………………………………………………………………………………44

 

2-6-1 پروتئین­های پلاسما  …………………………………………………………………………………………………………………………………45

 

2-6-2 اهمیت غلظت پروتئین پلاسما در تعیین چگونگی توزیع مایعات بین خون و بافت …………………………………………..45

 

2-6-3 مطالعات در مورد پروتئین  های پلاسما ………………………………………………………………………………………………………46

 

2-6-4 آلبومین پروتئین اصلی موجود در پلاسما ……………………………………………………………………………………………………48

 

2-6-5 نقش ایمنوگلوبولینهای پلاسما در مکانیسم­های دفاعی بدن  …………………………………………………………………………..49

 

2-6-6 انتقال وذخیره سازی لیپیدها  ……………………………………………………………………………………………………………………..50

 

2-6-7 چهار گروه اصلی لیپوپروتئین­های پلاسما  …………………………………………………………………………………………………..51

 

فصل سوم  …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………53

 

مواد و روشها  …………………………………………………………………………………………………………………………………………………….53

 

3-1 محل وزمان آزمایش  ……………………………………………………………………………………………………………………………………54

 

3-2 آماده سازی سالن  ………………………………………………………………………………………………………………………………………..54

 

3-3 جوجه­ریزی  ……………………………………………………………………………………………………………………………………………….54

 

3-4 مشخصات جیره ها  ……………………………………………………………………………………………………………………………………..55

 

3-5 پرورش جوجه ها  ……………………………………………………………………………………………………………………………………….56

 

3-6 آزمایشات  ………………………………………………………………………………………………………………………………………………….56

 

3-6-1  مصرف خوراک ………………………………………………………………………………………………………………………………………56

 

3-6-2 افزایش وزن هفتگی  ………………………………………………………………………………………………………………………………..57

 

3-6-3 ضریب تبدیل غذایی  ……………………………………………………………………………………………………………………………….57

 

3-6-4 وزن نهایی  ……………………………………………………………………………………………………………………………………………..58

 

3-6-5 فراسنجه های خون  …………………………………………………………………………………………………………………………………58

 

3-6-6 مورفولوژی روده  …………………………………………………………………………………………………………………………………….59

 

3-7 آنالیز داده های آماری  ………………………………………………………………………………………………………………………………….59

 

فصل چهارم :نتایج   ……………………………………………………………………………………………………………………………………………60

 

4-1 اثر جیره های آزمایشی بر عملکرد  ………………………………………………………………………………………………………………..61

 

4-1-1 ضریب تبدیل غذایی  ……………………………………………………………………………………………………………………………….61

 

4-1-2 مصرف خوراک  ………………………………………………………………………………………………………………………………………62

 

4-1-3 میانگین افزایش وزن  ……………………………………………………………………………………………………………………………….63

 

4-2 اثر تیمارهای آزمایشی بر مورفولوژی روده  …………………………………………………………………………………………………….64

 

4-3 اثر تیمارهای آزمایشی بر چربی و پروتئین سرم ……………………………………………………………………………………………… 65

 

فصل پنجم :بحث  ………………………………………………………………………………………………………………………………………………66

 

5-1 اثر جیره های آزمایشی بر عملکرد جوجه های گوشتی………………………………………………………………………………………67

 

5-2 اثر تیمارهای آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک  …………………………………………………………………………………………72

 

5-3 اثر تیمارهای آزمایشی بر چربی و پروتئین سرم ……………………………………………………………………………………………….76

 

 

6- نتیجه گیری …………………………………………………………………………………………………………………………………………………..78

 

7- پیشنهادات  ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………79

 

جداول  ……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..80

 

منابع  ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………100

 

فهرست جداول

 

1: ترکیب شیمیایی جیره های آزمایشی…………………………………………………………………………………………………………………..81

 

2: اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر ضریب تبدیل غذایی………………………………………………………………………………………….82

 

3: اثر تیمارهای مختلف آزمایشی برمصرف خوراک………………………………………………………………………………………………….83

 

4: اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر افزایش وزن  …………………………..   …………………………………………………………………..84

 

5: اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک (ددنوم) در 42 روزگی…………………………………………………..85

 

6: اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک (ددنوم) در 49 روزگی…………………………………………………..86

 

7: اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک (ژژنوم) در 42 روزگی …………………………………………………87

 

8 . اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک (ژژنوم) در 49 روزگی…………………………………………………88

 

9 . اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک (ایلئوم) در 42 روزگی  ……………………………………………….89

 

10 . اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک (ایلئوم) در 49 روزگی  ……………………………………………..90

 

11 . اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک (قائده سکوم) در 42 روزگی  …………………………………….91

 

12 . اثر تیمارهای مختلف آزمایشی بر مورفولوژی روده کوچک (قائده سکوم) در 49 روزگی  …………………………………….92

 

 

2-2- تاریخچه. 18

 

فصل سوم: روش شناسی.. 21

 

3-1- مواد و وسایل: 22

 

3-2- دستگاه ها: 24

 

3-3- محلول سازی: 25

 

3-3-1- آماده سازی محیط کشت: 25

 

3-3-2- محیط شکلات اگار: 26

 

3-3-3- آماده سازی ژل اگارز 1 درصد: 27

 

3-4- طراحی و روش اجرا: 27

 

3-4-1- جمع‏آوری نمونه: 27

 

3-5- کشت نمونه ها: 27

 

3-6- تست ‌های بیوشیمیایی: 28

 

3-7- رنگ آمیزی: 29

 

3-8- نگهداری ایزوله‌های بالینی هموفیلوس آنفلوانزا در شرایط کرایو در دمای -80ْ: 29

 

3-9- استخراج DNA.. 30

 

3-9-1-استخراج DNA به روش جوشاندن: 30

 

3-10- بررسی کیفیت و کمیت DNAاستخراج شده: 30

 

3-11- راه اندازی و انجام PCR: 31

 

3-12- واکنشPCR.. 32

 

3-13- الکتروفورز محصول PCR: 35

 

3-13-1- مواد و وسایل مورد نیاز: 35

 

3-13-2- نحوه تهیه ژل اگارز و انجام الکتروفورز: 35

 

3-14- تفسیر ژل الکتروفورز. 36

 

3-15- RFLP.. 36

 

3-15-1- استخراج باند اصلی از روی ژل اگارز. 37

 

3-15-2- بررسی غلظت محصولات تخلیص شده توسط دستگاه نانودراپ: 37

 

3-16- مواد و وسایل لازم برای RFLP: 37

 

3-16-1- روش انجام RFLP باآنزیمAlu1: 38

 

3-16-2- انجامRFLP باآنزیم محدودالاثر EcoR1: 38

 

3-17- تعیین توالی و پردازش داده ها: 38

 

3-17-1- ارسال نمونه‏ها جهت توالی یابی قطعه تکثیر شده: 39

 

فصل چهارم: تجزیه و تحلیل داده ها 40

 

4-1- تعداد نمونه‏ها و ایزولاسیون: 41

 

4-2-تستهای بیوشیمیایی: 42

 

4-3-نتایج بررسی کمیت و کیفیت DNA استخراج شده: 42

 

4-4- PCRژن ompP2 ایزوله‌های بالینی هموفیلوس آنفلوانزا: 43

 

4-5- RFLP: 44

 

4-6: نتایج تعیین توالی (Sequencing) و ثبت توالی‌ها دردیتابیسGeneBank/EMBL: 45

 

4-7- آنالیز بازهای حاصل از تعیین توالی نمونه ها: 46

 

4-7-1- آنالیز بازهای حاصل از تعیین توالی ایزوله بالینی شماره 3: 46

 

4-7-2. آنالیز بازهای حاصل از تعیین توالی ایزوله بالینی شماره 5: 47

 

4-7-3- آنالیز بازهای حاصل از تعیین توالی ایزوله بالینی شماره 8: 48

 

4-7-4- آنالیز بازهای حاصل از تعیین توالی ایزوله بالینی شماره 35: 49

 

4-7-5- آنالیز بازهای حاصل از تعیین توالی ایزوله بالینی شماره 47: 50

 

4-7-5- آنالیز بازهای حاصل از تعیین توالی ایزوله بالینی شماره14: 51

 

4-8- بررسی میزان شباهت و تفاوت ایزوله‌های بالینی تهران: 52

 

فصل پنجم: بحث و نتیجه گیری.. 56

 

5-1- آنالیز RFLP از ایزوله‌های بالینی: 57

 

5-2. آنالیز و بررسی جهش‌های ایجاد شده در ساختمان ژن ompP2 ایزوله شماره 3: 57

 

5-2-1آنالیز و بررسی جهش‌های ایجاد شده در ساختمان ژن ompP2 ایزوله شماره 5: 58

 

5-2-2- آنالیز و بررسی جهش‌های ایجاد شده در ساختمان ژن ompP2 ایزوله شماره 8: 58

 

5-2-3- آنالیز و بررسی جهش‌های ایجاد شده در ساختمان ژن ompP2 ایزوله شماره 35: 59

 

5-2-4- آنالیز و بررسی جهش‌های ایجاد شده در ساختمان ژن ompP2 ایزوله شماره 14: 60

 

 

5-2-5- آنالیز و بررسی جهش‌های ایجاد شده در ساختمان ژن ompP2 ایزوله شماره 47: 60

 

5-3- بحث: 61

 

پیشنهادات: 66

 

منابع. 67

 

فهرست منابع. 68

 

Abstract 75

 

پیوست ها 76

 

فهرست جداول

 

جدول3-1- مواد تشکیل دهنده و مقدار حجم آنها برای  PCRاز ompP2. 34

 

جدول 3-2- برنامه PCR برای تکثیر ژن ompP2. 34

 

جدول3-3- توالی پرایمرهای مورد استفاده برای ompP2. 35

 

جدول 4-1- اطلاعات نمونه‌های دریافتی از بیماران مورد مطالعه. 41

 

جدول 4-2 نتایج بررسی کمیت و کیفیت DNA استخراج شده 42

 

جدول 4-3- نتیجه Blast سکانس نوکلئوتیدی شماره 3 در NCBI 47

 

جدول 4-4- نتیجه Blast سکانس نوکلئوتیدی شماره 5 در NCBI 48

 

جدول 4-5- نتیجه Blast سکانس نوکلئوتیدی شماره 8 در NCBI 49

 

جدول 4-6- نتیجه Blast سکانس نوکلئوتیدی شماره 35 در NCBI 50

 

جدول 4-7- نتیجه Blast سکانس نوکلئوتیدی شماره 47 در NCBI 51

 

جدول 4-8-. نتیجهBlast سکانس اسید نوکئیک شماره 14 در NCBI 52

 

فهرست اشکال

 

شکل1-1- ساختارشیمیایی پلی ریبوزیل ریبیتول فسفا ت… 3

 

شکل1-3- کلو نی‌های هموفیلو س آنفولانزا روی محیط شکلات اگار. 5

 

شکل3-1-تست کاتالاز. 29

 

شکل 3-2- شکل باسیل گرم منفی هموفیلوس آنفلوانزا 30

 

شکل 3-3- دستگاه ترموسایکلر. 34

 

شکل 3-4- دستگاه الکتروفورز. 36

 

شکل4-1- ژن ompP2 ایزوله‌های با لینی… 43

 

شکل 4-2و4-3- جایگاه برش آنزیم محدودالاثر Alu1برای ژنompP2 ایزوله‌های بالینی… 44

 

شکل 4-4- جایگاه برش آنزیم محدودالاثر ECOR1برای ژن  ompP2ایزوله‌های بالینی… 44

 

شکل 4-5- کروماتوگرام به دست آمده از تعیین توالی ژن ompP2 نمونه شماره  14با پرایمر Forward.. 45

 

شکل 4-6- کروماتوگرام به دست آمده از تعیین توالی ژن ompP2نمونه شماره  14با پرایمر Revers. 45

 

شکل 4-7- آنالیز و مقایسه نمونه شماره 3 با اطلاعات ثبت شده در Gene Bank و بررسی توالی اسیدآمینه آنها 46

 

شکل 4-8- مناطق حفاظت شده پروتئین شماره 3.. 46

 

شکل 4-9- آنالیز و مقایسه نمونه شماره 5  با اطلاعات ثبت شده در Gene Bank و بررسی توالی اسیدآمینه آنها 47

 

شکل 4-10- مناطق حفاظت شده پروتئین شماره 5.. 47

 

شکل 4-11- آنالیز و مقایسه نمونه شماره 8 با اطلاعات ثبت شده در Gene Bank و بررسی توالی اسیدآمینه آنها 48

 

شکل 4-12- مناطق حفاظت شده پروتئین شماره 8.. 48

 

شکل 4-13- آنالیز و مقایسه نمونه شماره 35 با اطلاعات ثبت شده در  Gene Bankو بررسی توالی اسیدآمینه آنها 49

 

شکل 4-14- مناطق حفاظت شده پروتئین شماره 35.. 49

 

شکل 4-15- آنالیزو مقایسه نمونه شماره  47با اطلاعات ثبت شده در  Gene Bankو بررسی توالی اسیدآمینه آنها 50