4

 

 

1-1-2 کلزا و اهمیت اقتصادی آن……………………………………………………………………

 

 

 

5

 

 

1-2 تنش خشکی………………………………………………………………………………..

 

 

 

8

 

 

1-2-1 مکانیسم­های مقاومت به خشکی در گیاهان زراعی……………………………………………….

 

 

 

11

 

 

1-2-2 اثر تنش خشکی بر روی کلزا…………………………………………………………………

 

 

 

12

 

 

1-2-3- ﺗﺄثیر  تنش خشکی بر رشد و فتوسنتز………………………………………………………

 

 

 

14

 

 

1-2-4 اثر تنش خشکی روی آنزیم­های آنتی­اکسیدانت و مالون­دی­آلدهید………………………………

 

 

 

18

 

 

1-2-5 ﺗﺄثیرتنش خشکی بر میزان نیترات و نیترات ردوکتاز…………………………………………….

 

 

 

19

 

 

1-2-6 ﺗﺄثیر  تنش خشکی بر القای اسمولیت­های سازگار………………………………………………

 

 

 

21

 

 

1-3 کلیاتی در زمینه مسیر درک علامت (Singal transduction) در گیاهان…………………………….

 

 

 

21

 

 

1-3-1 اثر تنش­های محیطی در فرایند­های مولکولی در گیاهان………………………………………………………….

 

 

 

23

 

 

1-3-2 مسیرهای ژن­های کنترل کننده تنش­های غیر­زنده………………………………………………………………………

 

 

 

24

 

 

1-4 ژن­های مورد مطالعه…………………………………………………………………………………………………………..

 

 

 

24

 

 

1-4-1 پروتئین‌کینازها………………………………………………………………………………………………………………

 

 

 

26

 

 

1-4-2 خانواده ژنیMAPK  ……………………………………………………………………………………………………..

 

 

 

28

 

 

1-4-3 ژن حساس به اکسین………………………………………………………………………………….

 

 

 

 

33

 

 

فصل دوم: مواد و روش­ها………………………………………………………………………

 

 

 

34

 

 

2-1 شرایط رشد………………………………………………………………………………………………………………….

 

 

 

34

 

 

2-1-1 نحوه تیمار­دهی گیاهان…………………………………………………………………………………………………

 

 

 

35

 

 

2-1-2  برداشت نمونه……………………………………………………………………………………………………………

 

 

 

35

 

 

2-1-2-1 برداشت نمونه جهت انجام بررسی­های مولکولی……………………………………………..

 

 

 

35

 

 

2-1-2-2 برداشت نمونه جهت انجام بررسی­های فیزیولوژیک………………………………………………………………

 

 

 

36

 

 

2-2 روش های بکار گرفته شده در آزمایشات مولکولی………………………………………………………………………..

 

 

 

36

 

 

2-2-1 پودر کردن و آماده سازی نمونه جهت استخراج RNA ………………………………………………………….

 

 

 

36

 

 

2-2-2 استخراج RNA از بافت گیاهی……………………………………………………………………………………………………

 

 

 

36

 

 

2-2-3 اندازه­گیری میزان غلظت RNA و رقیق سازی نمونه­ها…………………………………………………………………..

 

 

 

37

 

 

2-2-4- روش تهیه cDNA………………………………………………………………………………………………

 

 

 

37

 

 

2-2-5- واکنش RT-PCR………………………………………………………………………………………………

 

 

 

38

 

 

2-2-6 تهیه ژل الکتروفورز……………………………………………………………………………………………………………………..

 

 

 

38

 

 

2-2-6-1 تهیه TBE 5X…………………………………………………………………………………………………

 

 

 

38

 

 

2-2-7 پرایمر­های استفاده شده در این پژوهش………………………………………………………………………………………….

 

 

 

38

 

 

2-3 روش­های بکار گرفته شده در آزمایشات فیزیولوژیکی……………………………………………………………………………

 

 

 

38

 

 

2-3-1  طرز تهیه عصاره گیاهی جهت تعیین میزان فعالیت آنزیم­های آسکوربات و گایاکول پراکسیداز…………………….

 

 

 

39

 

 

2-3-1-1 اندازه­گیری فعالیت آنزیم آسكوربات پراكسیداز(APX)………………………………………………………

 

 

 

39

 

 

2-3-1-2 اندازه­گیری فعالیت آنزیم گایاكول پراكسیداز(GPX)………………………………………………………..

 

 

 

39

 

 

2-3-2 سنجش فعالیت آنزیم کاتالاز………………………………………………………………………………………………………………..

 

 

 

40

 

 

2-3-3 اندازه­گیری میزان پراکسیداسیون چربی­ها (MDA)……………………………………………………………………………….

 

 

 

40

 

 

2-3-4 اندازه­گیری پروتئین کل…………………………………………………………………………………………………………….

 

 

 

41

 

 

2-3-5 اندازه­گیری قندهای محلول………………………………………………………………………………………………………………….

 

 

 

41

 

 

2-4 آنالیزهای آماری…………………………………………………………………………………………………………………………..

 

 

 

42

 

 

فصل سوم: نتایج………………………………………………………………………………………………………………………………….

 

 

 

43

 

 

3-1 نتایج حاصل از بررسی­های انجام یافته در سطح مولکولی…………………………………………………………………………….

 

 

 

43

 

 

3-1-1 بررسی بیان ژن Protein Kinase تحت اثر تنش خشکی در گیاه کلزا (B.napus)………………………….

 

 

 

45

 

 

3-1-2 بررسی بیان ژن MAPK4 تحت اثر تنش خشکی در گیاه کلزا (B.napus)…………………………………….

 

 

 

46

 

 

3-1-3 بررسی بیان ژن MAPK3 تحت اثر تنش خشکی در گیاه کلزا (B.napus)…………………………………….

 

 

 

48

 

 

3-1-4 بررسی بیان ژنAuxin responsive protein   تحت اثر تنش خشکی در گیاه کلزا (B.napus)……………

 

 

 

49

 

 

3-2 بررسی نتایج حاصل از آزمایشات فیزیولوژیکی…………………………………………………………………………………………….

 

 

 

49

 

 

3-2-1 بررسی اثر تنش خشکی بر میزان فعالیت آنزیم گایاکول پر­اکسیداز (GPX) درگیاه کلزا………………………………

 

 

 

50

 

 

3-2-2 بررسی اثر تنش خشکی بر میزان فعالیت آنزیم آسکوربات پراکسیداز (APX) درگیاه کلزا……………………………..

 

 

 

52

 

 

3-2-3 بررسی اثر تنش خشکی بر میزان فعالیت آنزیم کاتالاز (CAT) درگیاه کلزا……………………………………………..

 

 

 

53

 

 

3-2-4 بررسی اثر تنش خشکی بر میزان مالون­دی­آلدهید (MDA) درگیاه کلزا…………………………………………………

 

 

 

55

 

 

3-2-5  بررسی اثر تنش خشکی بر میزان پروتئین کل درگیاه کلزا…………………………………………………………………………..

 

 

 

55

 

 

3-2-6 بررسی اثر تنش خشکی بر میزان قندهای محلول درگیاه کلزا………………………………………………………………………

 

 

 

57

 

 

فصل چهارم: بحث و بررسی…………………………………………………………………………………………………………………………….

 

 

 

58

 

 

4-1- بررسی‌های انجام شده در سطح مولکولی……………………………………………………………………………………………………

 

 

 

61

 

 

4-2 بررسی­های انجام شده در سطح فیزیولوژیکی……………………………………………………………………………………………….

 

 

 

66

 

 

4-3 نتیجه­گیری کلی………………………………………………………………………………………………………………………………………..

 

 

 

67

 

 

4-4 پیشنهادات…………………………………………………………………………………………………………………………………….