دانلود پایان نامه ارشد: بررسی تنوع ژنتیکی درون جمعیتی و بین جمعیتی ماهی گورخری فارسیAphanius farsicus Teimori, Esmaeili & Reichenbacher, … |
1- 1- 2- 1- سیستماتیک……………………………………………………………………………………………… 5
1- 1- 2- 2- ویژگیهای مریستیک ……………………………………………………………………………… 6
1- 1- 2- 3- رنگ……………………………………………………………………………………………………………. 6
1- 1- 2- 4- زیستگاه……………………………………………………………………………………………………… 6
1- 2- معرفی حوضهی آبی مورد مطالعه…………………………………………………………………………………….. 7
1- 2- 1- دریاچهی مهارلو…………………………………………………………………………………………………….. 7
1- 2- 2- وضعیت حوضهی آب ریز دریاچهی مهارلو…………………………………………………………. 9
1- 2- 3- چشمه های منتهی به دریاچهی مهارلو………………………………………………………………. 10
1- 2- 4- تشکیلات زمین شناسی……………………………………………………………………………………….. 11
1- 2- 5- آب و هوا……………………………………………………………………………………………………………….. 11
1- 3- مطالعات مولکولی……………………………………………………………………………………………………………… 11
1- 3- 1- مطالعات تنوع ژنتیکی در ماهیان………………………………………………………………………… 12
1- 3- 2- تکنیکهای مولکولی…………………………………………………………………………………………….. 12
1- 3- 2- 1- تکنیکهای DNA……………………………………………………………………………………. 12
1- 3- 2- 1- 1- تكنیك PCR………………………………………………………………………………………. 12
1- 4- ژنوم هسته………………………………………………………………………………………………………………………… 13
1- 4- 1- DNAتکراری…………………………………………………………………………………………………………. 13
1- 4- 1- 1- VNTR ((Variable Number Tandem Repeat………………………………….. 14
1- 4- 1- 2- ریز ماهواره (Microsatellite) …………………………………………………………………… 15
1- 5- تعیین ساختار ژنتیکی جمعیت ………………………………………………………………………………………. 16
1- 5- 1- مدل هاردی- واینبرگ و دلیل انحراف از آن…………………………………………………….. 16
عنوان صفحه
1- 5- 2- F- Statistics………………………………………………………………………………………………………… 18
1- 5- 3- شباهت و فاصلهی ژنتیکی…………………………………………………………………………………… 19
1- 6- هدف از انجام پژوهش………………………………………………………………………………………………………. 20
فصل دوم : مروری برمطالعات گذشته
2- 1- مطالعات انجام شده روی جنس Aphanius…………………………………………………………………… 22
2- 2- مطالعات انجام شده در مورد گونه Aphanius farsicus در ایران…………………………………. 24
فصل سوم: مواد و روش ها
3- 1- نمونه برداری……………………………………………………………………………………………………………………… 26
3- 2- مطالعات مولكولی……………………………………………………………………………………………………………… 28
3- 2- 1- استخراج DNA …………………………………………………………………………………………………… 28
3- 2- 1- 1- ارزیابی کیفیت و کمیت DNA استخراج شده………………………………………. 29
3- 2- 2- انتخاب آغازگر……………………………………………………………………………………………………….. 30
3- 2- 3- انجام واکنش زنجیرهیی پلیمراز (PCR)……………………………………………………………… 31
3- 2- 4- الکتروفورز محصول PCR…………………………………………………………………………………….. 34
3- 2- 4- 1- تهیهی آکریل آمید 30 درصد…………………………………………………………………. 34
3- 2- 4- 2- تهیهی X)10TBE((Tris, Boric Acid,EDTA)…………………………………… 34
3- 2- 4- 3- آمونیوم پر سولفات 10٪(A.P.S) (Amonium per sulfate)……………….. 34
3- 2- 4- 4- TEMED…………………………………………………………………………………………………… 35
3- 2- 4- 5- تهیه ژل پلی آکریل آمید 7٪………………………………………………………………….. 35
3- 2- 4- 5- 1- تجهیزات مورد استفاده……………………………………………………………………….. 35
3- 2- 4- 5- 2- روش کار……………………………………………………………………………………………… 35
3- 2- 5- رنگ آمیزی ژل پلی آکریل آمید با نیترات نقره…………………………………………………. 36
3- 2- 5- 1- مواد مورد استفاده……………………………………………………………………………………… 36
3- 2- 5- 2- تجهیزات مورد استفاده……………………………………………………………………………… 36
3- 2- 5- 3- روش کار……………………………………………………………………………………………………. 36
3- 2- 6- ثبت تصاویر……………………………………………………………………………………………………………. 36
3- 2- 7- آنالیز آماری……………………………………………………………………………………………………………. 37
عنوان صفحه
فصل چهارم: نتایج
4- 1- نتیجهی بررسی كیفیت و كمیت DNA استخراجی…………………………………………………….. 39
4- 2- نتایج PCR………………………………………………………………………………………………………………………… 39
4- 3- تعداد و طول آللها…………………………………………………………………………………………………………… 41
4- 4- فراوانی آللها…………………………………………………………………………………………………………………….. 41
4- 5- تعداد آالل واقعی (Na) و موثر (Ne)………………………………………………………………………………… 42
4- 6- تنوع ژنتیكی……………………………………………………………………………………………………………………… 43
4- 7- تعادل هاردی- واینبرگ………………………………………………………………………………………………….. 45
4- 8- آنالیز آماری AMOVA……………………………………………………………………………………………………. 46
4- 9 جریان ژنی (ضریب مهاجرت)……………………………………………………………………………………………… 48
4- 10- شباهت و فاصله ژنتیكی………………………………………………………………………………………………… 49
فصل پنجم: بحث و نتیجه گیری
5- 1- تنوع ژنتیکی……………………………………………………………………………………………………………………… 52
5- 2- تعادل هاردی- واینبرگ………………………………………………………………………………………………….. 54
5- 3- تمایز ژنتیکی…………………………………………………………………………………………………………………….. 55
5- 4- جریان ژنی ( مهاجرت)…………………………………………………………………………………………………….. 57
5- 5- نتیجه گیری نهایی……………………………………………………………………………………………………………. 59
5- 6- پیشنهادها……………………………………………………………………………………………………………………………. 60
5- 7- توصیه ها…………………………………………………………………………………………………………………………… 60
فهرست منابع و مآخذ
منابع فارسی ………………………………………………………………………………………………………………………………….. 61
منابع انگلیسی…………………………………………………………………………………………………………………………………. 63
فهرست جدول ها
عنوان صفحه
جدول 3- 1 منطقههای نمونه برداری و تعداد ماهی گورخری فارسی مورد مطالعه در این پژوهش 29
جدول3- 2 خصوصیات جایگاههای ژنی (آغازگر) مورد استفاده در این پژوهش……………………… 31
جدول3- 3 نوع و مقدار مواد مورد استفاده برای PCR در این پژوهش…………………………………… 31
جدول3- 4 برنامه چرخه حرارتی PCR جهت بررسی تنوع ژنتیکی جمعیتهای ماهی
گورخری فارسی با استفاده از آغازگرAf7…………………………………………………………………………………….. 32
جدول3- 5 برنامه چرخه حرارتی PCR جهت بررسی تنوع ژنتیکی جمعیتهای ماهی
گورخری فارسی با استفاده از پرایمر Af20……………………………………………………………………………….. 32
جدول 3- 6 برنامه چرخه حرارتی PCR جهت بررسی تنوع ژنتیکی جمعیتهای ماهی
گورخری فارسی با استفاده از پرایمر Af20b………………………………………………………………………………. 32
جدول3- 7 برنامه چرخه حرارتی PCR جهت بررسی تنوع ژنتیکی جمعیتهای ماهی
گورخری فارسی با استفاده از پرایمر Af61……………………………………………………………………………….. 33
جدول3- 8 برنامه چرخه حرارتی PCR جهت بررسی تنوع ژنتیکی جمعیتهای ماهی
گورخری فارسی با استفاده از پرایمرAf18…………………………………………………………………………………. 33
جدول4- 1 شرایط PCRدر جایگاههای ژنی مورد مطالعه در ماهی گورخری
فارسی…………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 40
جدول 4- 2 تعداد و طول آللهای بهدست آمده (بر حسب bp) در پنج جایگاه ژنی مورد
مطالعه در ماهی گورخری فارسی…………………………………………………………………………………………………. 41
جدول 4- 3 فراوانی آللی در پنج جایگاه ژنی مورد مطالعه درماهی گورخری فارسی…………….. 42
جدول4- 4 تعداد آلل واقعی (Na) و موثر (Ne) در پنج جایگاه ژنی برای هر جمعیت ماهی
گورخری فارسی در منطقههای مورد مطالعه……………………………………………………………………………… 43
جدول4- 5 میانگین تعداد آلل واقعی (Na) و موثر (Ne) برای هر جمعیت ماهی
گورخری فارسی در منطقههای مورد مطالعه……………………………………………………………………………….. 43
جدول 4- 6 مقادیر هتروزیگوسیتی مشاهده شده (Ho) و مورد انتظار (He) برای هرجمعیت از ماهی گورخری فارسی در منطقههای مورد مطالعه درهر جایگاه ژنی………………………………………………………………………………………………………. 44
عنوان صفحه
جدول 4- 7 مقادیرهتروزیگوسیتی مشاهده شده و مورد انتظار در سطح پنج جایگاه ژنی در كل نمونههای ماهی گورخری فارسی…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 44
جدول4- 8 میانگین هتروزیگوسیتی مشاهده شده (Ho) و مورد انتظار ((He برای هر جمعیت ماهی گورخری فارسی در منطقههای مورد مطالعه…………………………………………………………………………………………………………………………………….. 44
جدول 4- 9 بررسی تعادل هاردی- واینبرگ در پنج جایگاه ژنی برای هر جمعیت ماهی گورخری فارسی در منطقههای مورد مطالعه ……………………………………………………………………………………………………………………………………………. 45
جدول 4- 10 میزان FST محاسبه شده بر اساس آزمون AMOVAبین جمعیتهای ماهی گورخری فارسی در مناطق مورد مطالعه …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 46
جدول4- 11 آنالیز واریانس مولكولی (AMOVA) ماهی گورخری فارسی. Df (درجه آزادی)، SS(مجموع مربعات)،Ms (انحرافات میانگین مربع)، Prob …………………………………………………………………………………………………………………….. 47
جدول 4- 12 میزان RSTمحاسبه شده بر اساس آنالیز AMOVA بین جمعیتهای ماهی گورخری فارسی در مناطق مورد مطالعه …………………………………………………………………………………………………………………………………………………………. 47
جدول4- 13 آنالیز واریانس مولكولی (AMOVA) در ماهی گورخری فارسی. Df (درجه آزادی)، SS (مجموع مربعات)، Ms (انحرافات میانگین مربع)، Prob …………………………………………………………………………………………………… 48
جدول 4- 14 میزان جریان ژنی محاسبه شده بین جمعیتهای مناطق مورد مطالعه در ماهی گورخری فارسی بر اساس آنالیز AMOVA………………………………………………………………………………………………………………………………………. 49
جدول 4- 15 ماتریس فاصله ژنتیكی (اعدادزیر قطر) و شباهت ژنتیكی (اعداد بالای قطر) بین جمعیتهای مناطق مورد مطالعه در ماهی گورخری فارسی……………………………………………………………………………………………………………………. 49
فهرست شکل ها
عنوان صفحه
شکل1- 1- الف: نر، ب: ماده و ج: زیستگاه طبیعی A. farsicus……………………………………………… 6
شکل1- 2- عكس هوایی از دریاچهی مهارلو و موقعیت آن نسبت به شهر شیراز……………….. 8
شكل1- 3- عكس هوایی از دریاچهی مهارلو و موقعیت آن نسبت به کوههای اطراف………….. 8
شكل 1- 4- نقشهی حوضههای آبریز استان فارس و موقعیت حوضهی مهارلو و دریاچه آن در پهنهی استان 10
شكل3- 1- عكس هوایی از دریاچهی مهارلو و موقعیت برخی از چشمه های مورد مطالعه در این پژوهش (نقاط قرمز رنگ) نسبت به آن……………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 27
شكل3- 2- عكس هوایی از حاشیهی شمال غربی دریاچهی مهارلو و آبهای ورودی به آن 27
شکل 4- 1 نتایج حاصل از FST بهدست آمده از آزمون AMOVA در ماهی
گورخری فارسی……………………………………………………………………………………………………………………………… 47
شکل4- 2 نتایج حاصل از RSTبهدست آمده از AMOVAدرماهی
فرم در حال بارگذاری ...
[سه شنبه 1399-10-09] [ 10:48:00 ب.ظ ]
|